액체배지와 고체배지의 차이점
배지 중에 고체배지와 액체배지가 있습니다. 배지는 한천을 굳혀서 만드는 미생물 증식,증균 검사 plate 입니다. 고체배지는 한천이 굳은 배지이며 액체 배지같은경우에는 한천이 굳지 않는 배지를 말합니다.
배지에 균을 접종한 후 Plate를 뒤집는 이유
간단합니다. 그이유는 배지는 수분량이 많습니다. 배지를 접종한 후에 그대로 배양을 시키게 되면 수분으로인한 수증기로 인해 집락을 관찰하기가 어렵기 때문입니다
미생물의 Agar의 함량에 따른 검사 방법
Agar의 함량에 따라서 검사의 방법이 다르게 됩니다. 이것이 물리적 성상에 의한 분류인데요.
3가지로 나뉠 수 있습니다. 액체 배지인 borth는 0%로 증식, 증균, 성상검사를 하게 됩니다.
Nutrient broth , pepton broth 등을 볼 수 있습니다.
다음 반고체 배지인 semi-solid 로써 함량은 0.3∼0.5%로 운동성 검사를 볼때 이 배지를 사용합니다.
SIM (sulfite indole motility) ,Mio (motility indole ornithine) 가 있습니다.
마지막으로 고체배지인 solid는 agar의 함량이 1.5∼2.0% 로써 세균분리보존과 colony 관찰에 좋습니다. 그래서 액체배지, 반고체배지, 고체배지로 크게 나뉘게 됩니다.
지시약에 따른 분류
배지의 제조에 있어서 colony 관찰시 PH의 산과 염기성, 또한 지시약에 따라서 반응하는 세균들의 색을 통해 동정할 수 있습니다. 그래서 저희는 미생물학에 있어서 배지 안의 지시약을 알기를 원합니다.
neutral red 의 지시약으로 사용하는 배지는 SS, Mac, DCA 등이 있으며 phenol red가 첨가되는 배지에는 KIA, TSI, urea, XLD, mannitol salt 있습니다. 그리고 BTB(Brom thymlo blue)에있어서 simmon citrate, 비브리오 동정할때 쓰는 TCBS 가 있습니다
malachite green 같은 경우에는 모든 결핵균 배지라고 생각을 하시면 됩니다. 또한 brilliant green 같은 경우에는 bismuth sulfite 배지입니다. 많이 들어본 methylene blue : EMB 배지에 지시약으로 있습니다. 지시약에 따른 분류를 표로 준비가 되어있으니 참고 바랍니다.
또한 지시약에 있어서는 균의 PH의 따라서 색이 변하는것이 특징입니다. 다음과 같이 표로 정리가 되어있습니다.
★ 대부분의 배지의 PH 는 7.0~7.5 입니다. 또한 진균배지에 사용되는 Sabouraud agar 나 corn meal agar 같은 경우에는 PH 5.6 이며 비브리오 (Vibrio) 를 배양하는 TCBS 배지나 Alkaline peptone borth의 PH 8.6 입니다.★
증균 배지 / 증식 배지 / 수송 배지
증균 배지는 다수의 균 중에 원하는 균만 빨리 증식시켜서 분리 배양이 쉽도록 만드는 배지입니다. 종류로는 Selenite broth (salmonella 증균)배지 Tetrathionate broth , GN Agar (그람 음성 배지), bile broth , 비브리오 증균을 시키는 Alkaline peptone borth가 있습니다.
증식 배지는 대체로 많은 영양분이 함유한 배지로써 다수의 균종이 자랄 수 있도록 하는 배지 입니다. 종류로는 Nutrient agar , Blood agar , brain heart infusion agar , Trypi soy agar , 혐기성균 배양 Thioglycollate agar등이 있습니다. 진균배지에 사용되는 Sabouraud agar도 포함됩니다.
그리고 수송 배지는 말그대로 수송 할 수 있는 배지를 말합니다. 중요합니다. buffered glycerol saline, Amie's , Carry & blair , Stuate's 가 있습니다.
특수배지 / 선택배지 / 감별하는 배지
어떠한 균을 증식, 증균시키기 위해 사용하는 특수배지의 종류입니다. 예를 들어서 최근에 배운 C.diphtheria 이 있습니다. 이 균의 성상을 보았더니 이염소체가 양성이였으며 Tellurate를 분해하는 능력이 있었습니다. 그래서 이균을 확실히 감별하기 위해서 이 균만 자랄 수있는 배지인 cysitine tellurite blood agar (CTBA)에 접종을 했더니 검은색의 집락을 보이게 되고 특유한 마늘냄새 나게됩니다.
선택배지는 특종 균종을 순배양하여 분리하기 위한 배지 입니다. 장 세균의 선택배지로는 Salmonella (살모넬라균) 같은 경우에는 sulfite agar, brilliant green agar , SS agar가 있으며 이질균(Shigella)은 Xylose lysine desoxyl cholate agar인 XLD를 선택배지로 사용합니다. 그밖에 HE agar, DC agar 등이 있습니다.
포도상 알균 선택배지에 Manitol salt agar(7.5% NaCl), Potassium tellurite blood agar, Staphylococcus 110 media(8.5% NaCl) 등이 있으며 동영상을 통해서 공부를 한 적이 있죠~ 그리고 장알균, 장구균 Pseudomonas 선택배지인 King A, King B 배지, NAC(Nalidix acid cetrimide) 배지→Nalidix acid : Gram (-) 발육억제 등이 있습니다.
감별배지는 그람 negative인 장세균 MacConkey agar 입니다. 그리고 coli form을 감별하는 EMB(Eosin mothylene blue)가 있으며 Endo agar는 salmonella, shigella, E.Coli로 사용됩니다. 그리고 lactose의 분해능을 조사하는 Desoxy choalte agar도 있습니다.
Autoclave를 하지않고 굳히는 배지의 종류
Selenite borth , BS agar, SS agar, XLD agar, DC agar, HE agar같은 경우에는 억제제가 많이 첨가되어있기 때문에 굳이 고압 멸균의 필요성이 없습니다. TCBS agar, 여과 멸균을 하는 Urea agar, Loeffler serum agar, Ogawa agar이 있다는 것도 알고 계시면 좋습니다.
여러가지 배지에 대해
BAP : blood agar plate 혈액을 첨가함으로써 용혈성을 볼 수 있는 검사
Chocolate agar hemoglobin, isoVitaeX 첨가 증균배지 CO2 배양 조건에서 Neisseria meningitides / N. gonorrhoease
MacConkey agar 그람 음성 막대균, 간균의 선택배지 유당을 발효하는 세균 확인하는 감별배지 - 분홍색 집락
Muller - Hinton media 항균제 감수성 배지
SS agar Salmonella & sigella 선택배지
TCBS 비브리오 선택배지 PH 8.6
배지와 IMViC검사에 대한 강의가 포함되어있습니다.
http://youtu.be/ErNOyVDVqCc
